Primer abordaje para la propagación de Anaplasma marginale (MEX-31-096) en células de garrapata Rm-sus

Abstract

Anaplasma marginale es una bacteria intraeritrocítica transmitida por garrapatas que causa la anaplasmosis bovina. Una limitante para el estudio de este microorganismo en México ha sido la dificultad para cultivarla in vitro. A la fecha, no se ha reportado el cultivo de aislados o cepas mexicanas de A. marginale, por lo que este es el primer abordaje para establecer la infección y propagación de la cepa MEX-31-096 en células de garrapata Rm-sus, utilizando eritrocitos infectados recién obtenidos como inóculo. La infección se confirmó por microscopia de luz observando el desarrollo de A. marginale en las células embrionarias de garrapata Rm-sus a partir del 2do día post inoculación (dpi) y alcanzando el 80% de células infectadas a los 8 dpi. Asimismo, la amplificación de la región variable del genmsp1a por PCR punto final fue positiva. Estos resultados demuestran que A. marginale (MEX-31-096) tiene la capacidad para infectar y propagarse en células Rm-sus, lo que permitirá obtener estos microorganismos bajo condiciones controladas y en menor tiempo facilitando el estudio sobre su fisiología y la interacción patógeno-vector.

Anaplasma marginale is an intraerythrocytic bacterium transmitted by ticks that causes bovine anaplasmosis. One of the limitations in the study of this microorganism has been the difficulty to cultivate it in vitro. To date, the cultivation of Mexican strains of A. marginale has not been reported. In this work we show the first approach to establish the infection and the propagation of the strain MEX-31-096 in cells of tick’s Rm-sus, using as inoculum freshly erythrocytes. The infection was confirmed by light microscopy, observing the development of A. marginale in the Rm-sus cells from the 2nd day after inoculation (dpi) and obtaining 80% of infected cells at day 8 dpi. Likewise, the amplification of the variable region of the msp1a gene by PCR endpoint was positive. These results demonstrate that A. marginale (MEX-31-096) has the capacity to infect and propagate in Rm-sus tick cells, which will allow obtaining these microorganisms under controlled conditions and in a shorter time facilitating the study of their physiology and pathogen-vector interaction.